ELISA試劑盒在試驗(yàn)過程中需要注意什么

更新時(shí)間：2020-10-12

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　　ELISA試劑盒是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的試驗(yàn)確診方法。盡管ELISA試劑盒的操作過程看似簡單，但沒做到位的話就會影響試驗(yàn)的作用。所以在試驗(yàn)過程中這幾點(diǎn)非常重要：

　　1、重要的洗刷：

　　不充分的洗刷會導(dǎo)致差異和高布景，從而帶來不抱負(fù)的試驗(yàn)結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。有必要的話，可添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過高，置疑洗刷不行時(shí)，能夠測驗(yàn)添加洗刷次數(shù)。

　　2、關(guān)鍵的關(guān)閉：

　　關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的時(shí)機(jī)。假如布景過高，置疑關(guān)閉不充分，那么能夠測驗(yàn)運(yùn)用更高濃度的關(guān)閉液，或適當(dāng)延伸關(guān)閉時(shí)間。

　　現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液：蛋白和非離子型去污劑。ELISA試劑盒運(yùn)用的類型須取決于多個因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。

　　3、抗體濃度須優(yōu)化：

　　假如試劑稍有不同，則或許需求優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會添加布景。為了防止這一點(diǎn)，切勿運(yùn)用過多的一抗或二抗。

　　4、檢測試劑要適量：

　　切勿運(yùn)用過多的檢測試劑。假如濃度過高，ELISA試劑盒或許未正確稀釋，則會導(dǎo)致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。

　　只要確保每一步操作都做到位，才會出現(xiàn)的試驗(yàn)結(jié)果。所以ELISA試驗(yàn)的每一步都很重要，不能夠漫不經(jīng)心。

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