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細(xì)胞爬片的制備

更新時(shí)間:2025-08-28點(diǎn)擊次數(shù):275

細(xì)胞爬片又名爬片。細(xì)胞爬片就是讓玻片浸在細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi),細(xì)胞在玻片上生長(zhǎng),主要用于組織學(xué),冰凍切片,細(xì)胞涂片,免疫組織化學(xué),原位雜交等。

下面給大家簡(jiǎn)單介紹細(xì)胞爬片的制備。

1.爬片可用一般的蓋玻片,也可用專用爬片;

2.應(yīng)用蓋玻片,可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪時(shí)可用前護(hù)士輸液用于打開(kāi)玻璃安瓶的小沙輪,或者是口腔科的那種小沙輪,輕輕劃一下后,稍用力一掰就分開(kāi)了。

如果接種大皿的話,我一般不將蓋玻片切開(kāi),直接清潔后放入培養(yǎng)皿中,到染色時(shí)再將之切開(kāi),這樣既保證了細(xì)胞均一性,又可同時(shí)做幾個(gè)指標(biāo)的染色。

3.將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡,第二天先用自來(lái)水沖洗20遍,再置于無(wú)水酒清中浸泡6小時(shí),再用三蒸水沖洗3遍(個(gè)人認(rèn)為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了,如果不干凈的話,細(xì)胞帖壁不好),放在飯盒或者玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進(jìn)行高壓消毒。

4.高壓后取出放入烤箱中烤干,備用??靖珊罂煞湃氤瑑襞_(tái)中。

5.關(guān)于多聚賴氨酸,很多人都將玻片用此處理,以使細(xì)胞與玻片結(jié)合更牢。但我在做爬片時(shí)從來(lái)沒(méi)用過(guò)多聚賴氨酸,細(xì)胞貼壁仍然很好,且在做后續(xù)的免疫細(xì)胞化學(xué)染色、TUNEL等凋亡檢測(cè)、免疫熒光等也從未脫過(guò)片。

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