剛果紅染色法特指用剛果紅將纖維素染色的方法。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，常用的剛果紅染色法有兩種。在剛果紅中加入氯化鈉可以可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去。

剛果紅的原理：

剛果紅篩選主要是根據(jù)菌落降解纖維素,可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚,更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng).在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明圈。

剛果紅染色法的使用：

方法一,先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行焰色反應(yīng)

在長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mI。的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物質(zhì)的量濃度為l mol/l的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl溶液，此時(shí)，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn)透明圈。

（加NaCl的原因：剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為寡糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大小不一的透明圈，大的透明圈分解纖維素的能力就強(qiáng)）。

方法二，在倒平板時(shí)就加入剛果紅

配制質(zhì)量濃度為10 mg/mI的CR溶液，滅菌后，按照每200 mI。培養(yǎng)基加入1 mI。的比例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長(zhǎng)出茵落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會(huì)出現(xiàn)明顯的透明圈。