土壤堿性蛋白酶（Solid - Alcalase Protease，S-ALPT）試劑盒說明書
分光光度法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
英文名稱：Soil alkaline protease activity detection kit
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
貨號(hào)：BC0880
規(guī)格：50 管/24 樣
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：780
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤堿性蛋白酶活性檢測|土壤堿性蛋白酶|堿性蛋白酶|
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體60mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入100uL 試劑七使粉劑潤濕，然后加入20mL 試劑一，轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；
試劑四：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入50mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；
試劑五：液體10mL×1 瓶，4℃保存；
試劑六：液體1.5mL×1 支，0.05mg/mL 標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液；
試劑七：液體1.5mL×1 支，4℃保存；

產(chǎn)品說明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ALPT 在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。堿性條件下，S-ALPT 可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm 有特征吸收峰。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水

操作步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長680nm，蒸餾水調(diào)零。
2、試劑二、三和四40℃水浴10min。
3、樣本測定：

試劑名稱                測定管                  對照管
風(fēng)干土樣（g）          0.02                      0.02
試劑一（μL）            100                      300
試劑三（μL）            200
混勻后，40℃水浴30min，振蕩5-6 次，使土樣與反應(yīng)液充分接觸
試劑二（μL）            100                       100
                 混勻，10000rpm 室溫離心10min，取上清液
                       測定管                   對照管                 標(biāo)準(zhǔn)管
上清液（μL）             150                       150
試劑六（μL）                                                             150
試劑四（μL）              700                      700                     700
試劑五（μL）              150                      150                     150
                 混勻，40℃水浴20min，680nm 下讀取各管吸光值A(chǔ)

注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測一次。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對照管。

S-ALPT 活性計(jì)算：
單位定義：每天每g 土樣中產(chǎn)生1mg 酪氨酸為一個(gè)S-ALPT 活力單位。
S-ALPT(U/g)=C 標(biāo)準(zhǔn)×(A 測定管-A 對照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管×V 反總÷W÷T=48×(A 測定管-A 對照管)÷A 標(biāo)準(zhǔn)管
C 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.05mg/mL；
V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.4mL；
T：反應(yīng)時(shí)間，30min=1/48d；
W：樣本質(zhì)量，0.02g。
土壤堿性蛋白酶活性檢測試劑盒
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Evaluating the effects of phytoremediation with biochar additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi》 作者:Manyun Zhang,Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, Ying Teng,Zhihong Xu 期刊:Environmental Science and Pollution Research 影響因子:2.914 PMID:29860689

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